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扫描电子显微镜 (SEM) is一种utilizing电子束扫描样品表面并获取其表面形貌and组成信息of显微镜. 它具have高分辨率, 大景深, 视野广, 成像立体感强etc.优点, 被广泛应用于材料科学, 生物学, 医学etc.领域.
SEMof基本原理is, through极狭窄of电子束扫描样品表面, 电子束with样品相互作用产生各种效应, 其中mainlyis样品of二times电子发射. 二times电子be able to产生样品表面放大of形貌像, 这pcs像isin样品被扫描时按时序建立起来of, 即using逐点成像of方法获得放大像.
相比透射电镜and光学显微镜, SEM具have介于它们之间of分辨率and成像特点. 它can直接observe各种试样凹凸不平表面of细微结构, 试样制备simple, 放大倍数可in2-20万倍之间连续可调, 具have很大of景深and视野, 成像富have立体感.
in生物学领域, SEM被广泛应用于cell生物学, tissue学and病理学etc.领域. for example, canusingSEMobservecell表面of超微结构, cell间of相互作用, cellwith基质of相互作用etc.. 此外, SEM还can用于observevirus, bacteriaetc.microorganismof形态and结构, for医学researchand临床实践provide支持.
Service Process:
送样要求:
可接收固定好ofcell/tissue样品并附have详细送检要求of送样单
①need您provideof样品: 收集cell/tissue取样 (新鲜迅速取材) , 置于1.5mlcentrifuge管内, 加入2.5%of戊二醛溶液(固定液加满centrifuge管, 使样品完全浸没in固定液中), 放置于4℃store, 请不要倒弃固定液, generally固定12h后可寄送 (务必adopting1.5mlcentrifuge管寄送) .
②打印填写完整of预约单, 送样单and样品一起寄送.
样品取材及固定常用方法:
cell类 | 106以上ofcell, 用cell刮刀刮下来,1500-3000转centrifuge, 5-10min, 收集cell于1.5ml或2mlcentrifuge管, 管底肉眼可见2-3粒大米状样品, such as果cell量很多, 把cell团块用细针尖挑成几pcs小团块, 弃上清, 沿管壁缓慢加入4℃预冷of固定液, 固定液完全浸没样品, 可放置于4°Cstore. |
tissue类 | 新鲜取材, 取材位置accurate, tissue大小尽量in1-2mm³, 离体取材后请尽快投入4℃预冷of固定液中, 固定液完全浸没tissue, 可放置于4°Cstore. |
bacteria类 | 吸取OD0.5-0.8ofculture物, centrifuge后弃Culture Medium, 收集菌体沉淀于管底黄豆大小, can用PBS洗1-2times, 齐上清, 沿管壁缓慢加入4℃预冷of固定液, 固定液完全浸没样品, 可放置于4°Cstore. |
*such as样品取材及固定have疑问请及时withwe沟通 交付内容: 每样provide8张拍摄图片 (不provideanalyze服务) , such as需照片数量超过8张将产生额外费用; 结果反馈请in测试完成一weeks内, 不recommend回收样品, such ashaveneed请提前反馈给指南针工作人员. | |
1. 2.5%戊二醛固定液such as何配置?
市售25%戊二醛水溶液 10ml
0.2M磷酸盐缓冲液 (pH7.0) 50ml
蒸馏水加至 100ml
2. 0.2M, pH7.0磷酸缓冲液of配置方法?
A液: Na2HPO4·H2O 31.61g, orNa2HPO4·7H2O 53.63g, orNa2HPO4·12H2O 71.64g, 加蒸馏水至1000ml
B液: NaH2PO4·H2O 27.6g, orNaH2PO4·2H2O 31.21g, 加蒸馏水至1000ml
0.2M, pH7.0磷酸缓冲液= A液61ml+B液39ml (合起来is100ml)
3. for什么要加固定液?
固定液isfor了保持cell, tissueof固have形态and结构.
4. 扫描电镜制样流程?
新鲜取材后用2.5%戊二醛固定液固定样本, 4℃过夜放置, 倒掉2.5%戊二醛固定液, 用0.1M, pH7.0of磷酸缓冲液漂洗样品三times, 每times15min; 用1%of锇酸溶液固定样品1-2h; 小心取出锇酸废液, 用0.1M, pH7.0of磷酸缓冲液漂洗样品三times, 每times15min; 用梯度浓度 (including30%, 50%, 70%, 80%, 90%and95%五种浓度) of乙醇溶液对样品进行脱水process, 每种浓度process15min, 再用100%of乙醇process两times, 每times20 min. 用乙醇with醋酸异戊酯of混合液 (V/V=1/1) process样品30min, 再用纯醋酸异戊酯process样品1h或放置过夜. 临界点干燥. 镀膜, observe. process好of样品in扫描电镜中observe.
