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MALDI-TOF (Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Time of Flight Mass Spectrometry) 即基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱, is一种常用于protein分子量determineof技术. 以下is关于MALDI-TOFprotein分子量determineof一些信息:
基本原理: MALDI-TOF技术将analyze物 (such asprotein) 分散in基质分子中并形成晶体. 当用激光照射晶体时, 基质分子吸收能量并导致能量蓄积, 迅速产热, 从而使基质晶体升华, 致使基质andanalyze物膨胀并进入气相. 随后, MALDI产生of离子through飞行时间 (TOF) detect器进行detect. 理论上, 只要飞行管of长度足够, TOFdetect器candetect到of分子质量数没have上限, 因此very适合对protein, 多肽etc.生物大分子ofresearch.
分子质量determine: MALDI-TOFdetermineofisprotein或多肽etc.样品of真实分子量. 然而, 由于instrument分辨率, 基质of选择, 测试参数of设定as well as实验操作etc.因素, 所测得of值with理论值之间可能会存in一定of误差. 这pcs误差usuallyindetect标准of范围内, 因此数据仍然is可信and可用of.
分辨率andaccurate度: MALDI-TOFdetermine分子质量ofaccurate度and分辨率with待测样品本身of分子质量大小have关. usually, 分子质量越小of样本测试of分辨率andaccurate度越高. for example, 对于小分子多肽样品, MALDI-TOFof测试分辨率can达到18000以上; 小分子量ofprotein样品测试分辨率in10000以上, 而大分子量ofprotein样品测试分辨率in5000以上. 对于相对分子质量较大ofprotein, 平均质量with理论质量相差较大, 因此只能获取平均相对分子质量.
质量determine范围: MALDI-TOF本身具have质量determine范围宽of优势, 对于protein分子而言, 其candetermineof分子质量most高可达200kDa.
| 产品名称 | Sample Type | 送样量 | 预processandstore | 备注 |
| MALDI-TOF/TOF分子量 | 固体or溶液 | 5000万以下分子量: 溶液要求浓度达到100ng/ul 5000-10万of大protein: 溶液浓度要求1ug/ul以上 | 样本process后, -80°Cstore, 干冰transport | 要求样品盐浓度越低越好, most好低于50mM |
样品纯度Question:
Question: such as果样品中存in杂质, 会对MALDI-TOFof测量结果产生什么影响?
Answer: 样品中of杂质可能会影响质谱图of解析andproteinofaccurate分子量determine. 杂质可能产生额外of质谱峰, 干扰目标proteinof信号, 导致错误of分子量determine.
基质选择Question:
Question: for什么选择合适of基质对于MALDI-TOFanalyze很important?
Answer: 基质inMALDI过程中起到能量传递and样品分散of作用. 选择合适of基质can提高proteinof离子化效率, 减少碎片离子of产生, 从而得到更accurateof分子量信息.
结晶效果Question:
Question: 结晶效果对MALDI-TOFanalyzehave何影响?
Answer: 结晶效果直接影响激光with样品of相互作用. 良好of结晶can使样品均匀分散in基质中, 提高激光能量ofutilizing效率, 从而得到更好of质谱图.
激光能量Question:
Question: 激光能量对MALDI-TOFanalyzehave何影响?
Answer: 激光能量决定了样品分子离子化of程度. 激光能量过低可能导致不完全离子化, 而过高则可能产生过多of碎片离子. 因此, 选择合适of激光能量对于获得accurateof分子量信息至关important.
Data ProcessingandanalyzeQuestion:
Question: such as何正确processand解释MALDI-TOFof质谱数据?
Answer: 正确processand解释质谱数据is获得accurate分子量信息of关键. 这including基线校正, 峰识别, 峰面积计算etc.步骤. usingprofessionalof质谱analyze软件can帮助提高Data ProcessingandanalyzeofAccuracy.
分辨率andSensitivity限制:
Question: MALDI-TOFof分辨率andSensitivity对protein分子量determineof影响is什么?
Answer: MALDI-TOFof分辨率决定了be able to区分不同分子量proteinof能力, 而Sensitivity则决定了be able todetect到ofmost低protein浓度. 较低of分辨率andSensitivity可能导致分子量determineof不accurate或无法detect到低丰度ofprotein.
样品制备Question:
Question: such as何optimizeMALDI-TOFof样品制备过程以提高测量Accuracy?
Answer: optimize样品制备过程is提高MALDI-TOF测量Accuracyof关键. 这including选择合适of样品process方法, 调整基质with样品of比例, optimize结晶条件etc.. 遵循标准操作程序并严格控制实验条件can提高样品制备of重复性andreliable性.
usingMALDI-TOF技术测量protein分子量时, 可能会遇到一些常见Question.
