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方法简介
二硫键isthroughprotein中两pcs半胱氨酸上of巯基氧化而形成of, is一种importantofprotein翻译后修饰. in非还原状态下, 用IAA将protein游离ofCys封闭, 再分别用Trypsin, Chymotrypsin, Glu-C进行enzyme切, enzyme解产物through质谱detect后进行analyze, through匹配所得到ofMS/MS图谱, 找出二硫键连接of肽段, 确定二硫键of配对方式.
关于样品: 请确保protein浓度大于1mg/ml, most小量不得低于50Pmol, protein纯度most好大于90%; 含盐量: 挥发性无机盐<20mM, 不挥发性无机盐<5mM; protein溶液避免SDSetc.变性剂, 表面活性剂, 或其它保护剂, 不含tris缓冲体系.
样品transport: 请using足量of干冰transport, 并尽量选用较快of邮递方式, 以降低transport过程中样品降解of可能性.
二硫键配对analyzeis一种importantofproteinanalyze技术, mainly用于researchprotein中半胱氨酸残基之间through硫硫键形成of共价键of连接方式and位点. 这种共价键对于stable多肽of三维构象, 维持proteinof高级结构andstable状态至关important.
in二硫键配对analyze中, usuallyadopting质谱法作formainlyofanalyze手段. 这种方法结合化学或enzyme切方法打开特定of二硫键, 然后throughanalyze产生of多肽片段来推测二硫键of配对情况. 此外, 还canutilizing高分辨率质谱技术, 结合实验经验, provide高水平of针对多肽药物of二硫键analyze解决方案, including样品制备方法, 质谱Analysis Methodas well as配套of软件analyze.
二硫键配对analyzein生物医药领域have着广泛of应用. for example, inantibody类药物of研发and生产过程中, 二硫键of正确配对对于单抗分子维持构型and发挥功能very关键. 因此, 对二硫键ofanalyzeis药物关键质量属性考察ofimportant内容.
through二硫键配对analyze, wecan确保多肽药物in生产过程中ofQuality Control, 也canin研发阶段帮助weoptimize药物设计, 提高药物ofstable性and活性. 这对于促进人类健康and生命科学发展, as well as推动精准医疗and科研服务具haveimportant意义.
