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产品定义
动物激素 (animal hormone) is由动物分泌cell或内分泌腺分泌of一类信息传递物质. 动物激素in动物of生长, 性发育, 营养代谢, cell呼吸, 生理代谢etc.生理过程中都发挥了veryimportantof生理作用.
应用方向
1,标志物挖掘
2,激素of调节功能
3,激素of作用机制
物激素analyzeofgenerally步骤:
提取: in室温下, 从动物tissue中提取激素. usually, 会加入特定of溶剂 (such as乙酸乙酯) 来提取激素, 并through涡旋混合andcentrifuge来分离and纯化激素.
净化: 提取后, 样品可能need进一步净化以去除杂质and干扰物质. 这可能涉及using不同of溶剂and色谱技术.
定性and定量analyze: using质谱仪etc.instrument对提取and净化of激素进行定性and定量analyze. 这canprovide关于激素种类and浓度of信息.
| Sample Type | 送样量 | 预processandstore |
| 动物tissue | ≥200 mg | PBS wash去除残留血液and污染物, 冲洗干净. 用tissue剪或手术刀将tissue剪切成 1cm3 左右of小块, 样品称重, etc.量分装. 液氮速冻, -80°C store, 干冰transport. |
| Serum | ≥300 μL | 收集好of全血室温静置 30-60 min, or 4°C 放置 2h, 3000 g centrifuge 10 min, 取上清, 液氮速冻, -80°C store, 干冰transport. |
| 血浆 | ≥300 μL | 收集好of全血加入抗凝剂 (推荐adopting肝素抗凝剂, 不recommendadopting柠檬酸or EDTA) , 室温静止 30 minutes, 1300g-2000g centrifuge 10min, 取上清, 液氮速冻, -80°C store, 干冰transport. |
| 尿液 | ≥200 μL | 5000×g 4°C centrifuge 30-60min, 取上清, -80°C store, 干冰transport. |
| 粪便 | ≥300 mg | 新鲜粪便样本收集好后, 立即用液氮速冻process15 min, store至-80℃冰箱 |
| 肠道内容物 | ≥300 mg | 新鲜肠道内容物样本收集好后, 立即用液氮速冻process15 min, store至-80℃冰箱 |
| 乳汁 | ≥200 μL | 收集母乳, -80°C store, 干冰transport. |
| 唾液 | ≥500 μL | 1000g-2000g 4°C centrifuge 10min, (或using 0.22μm 滤膜过滤) , 取上清, -80°C store, 干冰transport. |
| 淋巴液, 脑脊液, 羊水, 胆汁etc.体液 | ≥200 μL | 1000g-2000g 4°C centrifuge 10min, (或using 0.22μm 滤膜过滤) , 取上清, -81°C store, 干冰transport. |
| 穿刺样品 | ≥500 mg | 收集样品, adopting PBS wash去除样品表面泥土或污染物 (务必清洗干净! ! ) , 样品称重, etc.量分装, 液氮速冻, -80°C store, 干冰transport. |
| 软体动物tissue | ≥500 mg | 收集样品, adopting PBS wash去除样品表面泥土或污染物 (务必清洗干净! ! ) , 样品称重, etc.量分装, 液氮速冻, -80°C store, 干冰transport. |
| 悬浮culturecell | ≥10^7 | centrifuge收集悬浮cell (保证每copies收集ofcell数量一致! ! ) , adopting PBS 清洗两遍, 然后adopting生理盐水 (0.9%氯化钠溶液) 洗一遍, 每times清洗后adopting小于 1000g centrifuge力 4°C 低速centrifuge 3 minutes, 完全弃去上清 (上述整pcs过程需尽量迅速操作) , 收集in 1.5ml centrifuge管中. 液氮速冻后-80°C store, 干冰transport. |
| 贴壁culturecell | ≥10^7 | 收集culture好of贴壁cell (保证每copies收集ofcell数量一致! ! ) 去除干净Culture Medium, adopting预冷of PBS 洗两遍, 然后再times加入预冷ofPBS, 把culture容器中of所havecell都收集下来 (一定要刮取干净! ! ) , 收集in 1.5 mL centrifuge管中, 4°C 低速centrifuge, 完全弃去上清 (上述整pcs过程需尽量迅速操作) . cell沉淀in液氮速冻后-80°Cstore, 干冰transport. |
| Cell Culture上清 | ≥10 mL | 1000 g, 4°Ccentrifuge3 minutes, 取上清, -80°C store, 干冰transport. |
1, Sample Preparation: 质谱detectneed高质量of样品. 因此, 确保样品of新鲜性, stable性and代表性至关important. 样品ofprocess, 存储andtransport应尽量减少潜inof降解或修饰, 以确保analyzeofAccuracyandreliable性.
2, 样品of纯化and富集: 动物激素usually存in于复杂of生物基质中, 因此in进行质谱detect之前, usuallyneed对样品进行纯化and富集. 这canthroughusing特定of色谱技术, 免疫亲and柱etc.方法实现, 以去除杂质并提高激素of浓度, 从而增强质谱detectofSensitivityandAccuracy.
3, 质谱条件optimize: 质谱detectof条件对于结果ofAccuracyandreliable性至关important. 这including选择合适of电离方式 (such as电喷雾电离ESI或化学电离CI) , optimize质谱参数 (such as扫描范围, 分辨率, 碰撞能量etc.) as well as选择合适of质谱instrumentanddetect器. throughoptimize这些条件, can提高质谱detectofSensitivityandSpecificity.
4, Quality Control: in质谱detect过程中, 应严格控制各种潜inof干扰因素, such asreagentof质量, instrumentof性能, 操作of规范性etc.. 定期进行instrumentof校准and维护, 确保instrumentofstable性andAccuracy. 同时, using合适of内标或外标进行Quality Control, 以监测andanalyze过程ofstable性andreliable性.
5, 数据解释: 质谱detect产生of数据need进行适当of解释andanalyze. 这including对质谱图谱of解读, 对峰of识别and定量, 对结果of统计andanalyzeetc.. in解释数据时, 应考虑样品of复杂性, 激素ofSpecificityas well aswith其他化合物of潜in干扰etc.因素.
