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GC-MS Untargeted
1935 times
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Project Introduction

产品定义

utilizing气相色谱-质谱联用 (GC-MS) 技术, adopting衍生化方法对样本中of代谢物进行非靶向代谢组学detect, 再结合本地自建代谢物数据库and公共数据库进行信息匹配实现代谢物identify,through衍生化技术可增强对强极性物质of检出,such as氨基酸类化合物, have机酸, have机醇, have机胺类etc.化合物.


技术路线

image.png


技术优势

1.高性能instrument: adoptingLECO Pegasus BTinstrumentdetect;

2. 高定性accurate度: 自建1000+常见物质标品数据库+公共数据库, 结合保留时间指数, 碎片离子信息进行定性;

3.professionalprocess软件: adopting高性能ofChromaTOFData Processing软件解析数据;

4.技术成熟stable, 分辨率高, 选择性好.


推荐组合产品

1. GC非靶向代谢组+非靶代组plus: 全面research各类型小分子代谢物in样本中of变化情况and内in关系

2.  GC非靶向代谢组+protein/转录组: 上游 (protein/转录)+下游 (代谢) 表明因果


推荐应用领域

1.   生命科学

2.   疾病预防控制

3.   环境毒理research

4.   食品safe/食品风味

5.   石油化工

6.   药物research



Project Cases

Data Analysis

   服务标准

analyze类型

analyze内容

拟解决Question

标准analyze

质控

TICetc.多项QCanalyze

获得高质量数据

轮廓analyze

Superclass分类

获得代谢物of分类信息

差异analyze

单变量Statistical Analysis (火山图etc.)

反映每pcs变量of组间差异

多维Statistical Analysis (PCA,PLS-DA,OPLS-DAetc.)

评估组间差异, 找到导致组间差异of影响变量

功能analyze

层times聚类analyze

获得代谢物of表达模式信息

相关性analyze

衡量两pcs变量of相关程度

KEGGanalyze

进一步了解相关代谢通路and生物学功能

高级analyze

生信analyze

WGCNA

获得with表型强关联of核心代谢物

回归analyze

建立important代谢物and其他指标of关联

趋势聚类analyze

探讨代谢物of含量趋势模式


部分Data Analysis结果展示

image.png


Sample Requirements
组内样本数量Sample Type送样量预processandstore
临床样本≥30;
实验动物≥10;
植物≥8;
软体动物≥8;
microorganism≥6;
cell≥6
动物tissue≥200 mgPBS wash去除残留血液and污染物, 冲洗干净. 用tissue剪或手术刀将tissue剪切成 1cm3 左右of小块, 样品称重, etc.量分装. 液氮速冻,  -80°C store, 干冰transport.
Serum≥300 μL收集好of全血室温静置 30-60 min, or 4°C 放置 2h, 3000 g centrifuge 10 min, 取上清, 液氮速冻, -80°C store, 干冰transport.
血浆≥300 μL收集好of全血加入抗凝剂 (推荐adopting肝素抗凝剂, 不recommendadopting柠檬酸or EDTA) , 室温静止 30 minutes, 1300g-2000g centrifuge 10min, 取上清, 液氮速冻, -80°C store, 干冰transport.
尿液≥300 μL5000×g 4°C centrifuge 30-60min, 取上清,  -80°C store, 干冰transport.
粪便≥200 mg新鲜粪便样本收集好后, 立即用液氮速冻process15 min, store至-80℃冰箱
肠道内容物≥200 mg新鲜肠道内容物样本收集好后, 立即用液氮速冻process15 min, store至-80℃冰箱
乳汁≥300 μL收集母乳, -80°C store, 干冰transport.
唾液≥1 mL1000g-2000g 4°C centrifuge 10min, (或using 0.22μm 滤膜过滤) , 取上清, -80°C store, 干冰transport.
淋巴液, 脑脊液, 羊水, 胆汁etc.体液≥300 μL1000g-2000g 4°C centrifuge 10min, (或using 0.22μm 滤膜过滤) , 取上清, -80°C store, 干冰transport.
穿刺样品≥500 mg收集样品, adopting PBS wash去除样品表面泥土或污染物 (务必清洗干净! ! ) , 样品称重, etc.量分装, 液氮速冻, -80°C store, 干冰transport.
植物tissue≥500 mg收集样品, adopting PBS wash去除样品表面泥土或污染物 (务必清洗干净! ! ) , 样品称重, etc.量分装, 液氮速冻, -80°C store, 干冰transport.
植物体液≥300 μL5000×g 4°C centrifuge 30-60min, 取上清, -80°C store, 干冰transport.
土壤≥10 g收集样品, -80°C store, 干冰transport.
≥50 mL收集样品, 过滤(0.22μm滤膜), -80°C store, 干冰transport.
软体动物tissue≥500 mg收集样品, adopting PBS wash去除样品表面泥土或污染物 (务必清洗干净! ! ) , 样品称重, etc.量分装, 液氮速冻, -80°C store, 干冰transport.
低etc.bacteriacell≥10 ^ 9centrifuge收集etc.量菌体 (保证每copies收集of菌体cell数量一致! ! ) , adopting PBS 清洗三times, 每times清洗后 5000g 4°Ccentrifuge 5 minutes, 完全弃去上清, 收集in 1.5ml centrifuge管中. 液氮速冻, -80°C store, 干冰transport.
菌体 (fungus类)≥500 mg收集菌体 (保证每copies收集of菌体数量or重量一致! ! ) , adopting PBS 清洗三times, 每times清洗后 5000g 4°C centrifuge 5 minutes, 完全弃去上清, 收集in 1.5ml centrifuge管中. 液氮速冻, -80°C store, 干冰transport.
悬浮culturecell≥10^7centrifuge收集悬浮cell (保证每copies收集ofcell数量一致! ! ) , adopting PBS 清洗两遍, 然后adopting生理盐水 (0.9%氯化钠溶液) 洗一遍,  每times清洗后adopting小于 1000g centrifuge力 4°C 低速centrifuge 3 minutes, 完全弃去上清 (上述整pcs过程需尽量迅速操作) , 收集in 1.5ml centrifuge管中. 液氮速冻后-80°C store, 干冰transport.
贴壁culturecell≥10^7收集culture好of贴壁cell (保证每copies收集ofcell数量一致! ! ) 去除干净Culture Medium, adopting预冷of PBS 洗两遍, 然后再times加入预冷ofPBS, 把culture容器中of所havecell都收集下来 (一定要刮取干净! ! ) , 收集in 1.5 mL centrifuge管中,  4°C 低速centrifuge, 完全弃去上清 (上述整pcs过程需尽量迅速操作) . cell沉淀in液氮速冻后-80°Cstore, 干冰transport.
Cell Culture上清≥10 mL1000 g, 4°Ccentrifuge3 minutes, 取上清, -80°C store, 干冰transport.


FAQ

    1. 实验设计

    • control组设置: 确保实验设计包含适当ofcontrol组, 以区分实验process引起of代谢变化and背景变化.

    • 生物学重复: 进行足够of生物学重复以提高结果of统计效力.

    • 样本收集withprocess: 遵循标准化of样本收集, 存储andprocess流程, 以减少样本间of变异性.

    2. 样本制备

    • 代谢物提取: 选择合适of提取方法以确保most大程度地提取出代谢物, 同时避免代谢物of降解或修饰.

    • 内标using: 考虑添加内标物来校正实验过程中of技术变异.

    3. GC-MSanalyze

    • instrument校准: 定期进行instrument校准and维护, 确保instrument性能stable.

    • 方法optimize: according to代谢物of性质调整GC-MS方法, such as色谱柱选择, 升温程序, 电离方式etc..

    • 数据采集: 确保ininstrumentof线性范围内采集数据, 避免信号饱and或Detection Limit以下of数据.

    4. Data Processingwithanalyze

    • 数据预process: 进行基线校正, 噪声去除, 峰对齐and归一化etc.预process步骤.

    • 代谢物identify: 结合数据库搜索, 保留时间, 质谱碎片etc.信息进行代谢物identify.

    • Statistical Analysis: using适当of统计方法进行Data Analysis, such as主成分analyze (PCA) , 偏most小二乘判别analyze (PLS-DA) etc..

    • 代谢通路analyze: utilizing代谢通路数据库and软件进行代谢通路analyze, 以解释代谢物变化背后of生物学意义.

    5. 结果解释withvalidate

    • 结果解释: 结合实验目ofand背景知识, 合理解释代谢组学数据.

    • 后续validate: 对关键代谢物进行后续validate实验, such asusing其他analyze技术 (such asLC-MS) 进行confirm.

    6. Quality Controlwith报告

    • Quality Control: 实施严格ofQuality Control措施, such asusing质控样本, 监控instrument性能etc..

    • 报告撰写: 编写详细ofExperimental Report, including实验设计, 方法, 结果and讨论etc.部分.


 
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