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免疫电镜技术istissue样品经低温脱水渗透LR White树脂低温聚合包埋, 超薄切片70-80nm, 用Specificity一抗with待detectantigen结合然后用带have胶体金标记of二抗with一抗antigen复合物结合, in电子显微镜下observe, 由于二抗上of胶体金形成一定of电子密度而精确指示出相应antigenin亚cell水平上of定位.
免疫电镜技术成功of关键is:
①对cell超微结构of完好store;
②保证被检cell或其亚cell结构ofantigenin原位, 其antigen性不受损失;
③选择of免疫reagent能顺利穿透tissuecell结构withantigen结合.
该技术mainly用于virus, bacteriaetc.antigen定位, 免疫性疾病of发病机理及超微结构免疫cell化学researchetc..
具体操作方法:
1, 1-3min内取样, 取样tissue1mm3大小. 取材前可提前准备装have免疫电镜固定液A液ofculture皿, 将小tissue块离体取下后立即投入culture皿内, 用手术刀inculture皿of固定液中进行切割成 1mm3of小tissue块. 再将切割好of小tissue块转移至装have新of免疫电镜固定液ofEP管内继续固定.
2, 取材时尽量精确到needobserveof目of部位(such asobserve肾小球取肾皮质;observe胰岛取胰岛丰富of胰尾;皮肤, 肠胃etc.in固定液中易打卷oftissue可将tissue粘in滤纸上进行固定).
3, 取材时一定note避免镊子挤压etc.机械损伤, 刀片要锋利避免挫伤tissue.
4, tissue取下后立即投入免疫电镜专用固定液, 4℃store, 4℃冰袋transport, instoreandtransport过程中固定液切勿冷冻结冰. 样品固定后应尽快安排做后续包埋and免疫标记实验, 减少antigen丢失of可能性.
5, 结果observe图像采集: in透射电子显微镜下observe并采集图像, 黑色10nm大小of金颗粒即for阳性表达.
什么is免疫电镜测试 (IEM) ?
免疫电镜测试 (IEM) is一种utilizingantigenwithantibodySpecificity结合of原理, in超微结构水平对样品进行定位, 定性and定量researchof技术. 它结合了免疫tissue化学技术with透射电镜技术of优点, be able toprovide关于antigen或antibodyincell或tissue中of精确定位信息.
免疫电镜测试 (IEM) ofmainly应用is什么?
免疫电镜测试 (IEM) in生物学and医学research中具have广泛of应用. 它can用于researchcell器, virus, protein复合物etc.超微结构ofantigen或antibody定位, as well asvirus性疾病of诊断and病原体identifyetc.. 此外, IEM还can用于未知antigenof早期诊断andresearchcell间of相互作用etc..
免疫电镜测试 (IEM) of样品制备过程is怎样of?
免疫电镜测试 (IEM) of样品制备过程usuallyincluding固定, 脱水, 包埋, 切片and免疫标记etc.步骤. 首先, 样品need经过适当of固定and脱水process, 以保持其结构andantigen性. 然后, 样品被包埋in支持膜上, 并进行超薄切片. 接下来, utilizingSpecificityantibody对切片进行免疫标记, 以显示目标antigenof位置. most后, 将标记后of切片置于透射电镜下进行observeandanalyze.
免疫电镜测试 (IEM) of优势is什么?
免疫电镜测试 (IEM) of优势in于其高度ofSpecificityand敏感性. throughutilizingSpecificityantibodywithantigenof结合, IEMbe able toin超微结构水平对目标antigen进行精确定位, 并provide高分辨率of图像. 此外, IEM还can结合不同of标记方法, such as胶体金标记, 免疫铁protein技术etc., 以增加可视化and定量ofAccuracy.
免疫电镜测试 (IEM) of局限性is什么?
免疫电镜测试 (IEM) of局限性mainlyincluding操作繁琐, 耗时较长as well as对样品of损伤较大etc.. 样品制备过程中need经历多pcs步骤, including固定, 脱水, 包埋etc., 这些步骤可能会对样品of结构andantigen性造成一定of影响. 此外, IEMneed高技能of操作人员and昂贵ofinstrumentequipment, 限制了其in一些实验室of普及and应用.
免疫电镜测试 (IEM) is一种将免疫tissue化学技术with透射电镜技术相结合of方法, 用于in超微结构水平researchandobserveantigen, antibody结合定位. 以下is关于免疫电镜测试 (IEM) of一些常见疑问及其解A:
