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荧光显微镜is以紫外线for光源,用以照射被检物体,使之发出荧光,然后in显微镜下observe物体of形状及其所in位置. 用于researchcell内物质of吸收, transport, 化学物质of分布及定位etc..cell中have些物质, such as叶绿素etc., 受紫外线照射后可发荧光; 另一些物质本身虽不能发荧光, 但such as果用荧光染料或荧光antibodystain后, 经紫外线照射亦可发荧光, 荧光显微镜就is对这类物质进行定性researchof工具之一.
1,菌液/污泥/污水类样品
① 样品量: 5000 rpmcentrifuge10 min, 可得到绿豆大小沉淀, 参考图 (1.5 mLcentrifuge管) 大小of菌体沉淀
②bacteria类need死活stain/ROSstainof, generally加冰袋泡沫盒4度store, 样品不and冰袋接触.
③protein/多糖类stain, generally加冰袋泡沫盒4度storeor2.5%of戊二醛固定4度store, 样品不and冰袋接触.
④污泥类样品can进行冰切or刀切, 冰切收费50/样.
2, 生物膜样品
①样品量: 金属/瓷砖/岩石etc.块体类recommend长宽高尺寸不超过1 cm, 薄膜类直径尺寸不超过2 cm; 且均要求样品表面平整, need标出拍摄面.
②generally加冰袋泡沫盒4度store, 样品不and冰袋接触
③若in爬片上culture生物膜, 可将爬片粘于culture皿底部, 充满Culture Medium, 封口膜密封完全, 再4度store.
3, 植物类
①植物类样品可进行simple冰切及刀切, 软化etc.特殊类请走病理tissue切片测试项目
②generally加冰袋泡沫盒4度store, 样品不and冰袋接触
③做过of植物类样品淀粉, 胡萝卜, 土豆, 叶片, 根, 茎, 拟南芥etc..
4, needwithcell共cultureof样品:
①块体类 - 薄膜, 布料, 金属块, 纸片, 凝胶etc.
送样量:
(1) withcellof作用方式for直接接触of话,至少1pcs/种cell/时间点;
(2) 样本process方式for浸提of话, 可参考国标ISO 10993-12 2007中of浸提方式浸提, according to浸提方式按量anddetect时间点provide;
制样要求:若isneed把cell接种到材料上of话, 金属块, 凝胶类样本须制备成统一大小of圆形/方形, recommend制备直径for10-15 mm圆形. 布料, 纸片类样本可代for裁剪, 默认制备直径for15 mm.
②液体类
送样量:according to测试时样本浓度anddetect时间点而定, 按照单timesdetectneedof3-5倍of量寄送; 若adopting稀释后样本测试, 则须告知稀释倍数及工作液浓度; 若溶剂forhave机溶剂 (such asDMSO, 醇类, 酚类etc.) , most高工作液浓度中, 溶剂of占比低于0.5%; .
③粉末类
送样量:according to测试时样本浓度anddetect时间点而定, 按照单timesdetectneedof3-5倍of量寄送;
(1) 可溶性粉末: 注明溶剂of种类 (such as无水乙醇, 异丙醇, DMSO, Culture Medium, PBSor生盐水etc.) , 当样品对溶剂have特殊需求时, 请in送样时附加所需溶剂;
(2) 不可溶粉末: 注明样本性质, 灭菌方式, 及分散for均匀悬浮液所需必要步骤
5, needprovide清楚激发/发射波长, 拍摄倍数etc.要求,
6, stain剂, 标明染料名称and拍摄条件 (激发/发射波长)
7, cell类样品直接拍摄, need封片后常温避光邮寄.
8, 固体类直接拍摄样品recommend长宽不超过20mm, 厚度不超过10mm, 重量不超过10g, 一定标出测试面.
荧光显微镜 (FM) inusing过程中可能会遇到多种Question, 以下is一些常见ofQuestion及其可能of解决方案:
1.荧光异常: 荧光显微镜using荧光染料或标记of样本进行observe, 若出现荧光异常可能is染料或标记物ofQuestion, 也可能is显微镜镜头或荧光滤镜ofQuestion. can尝试更换荧光染料或标记物, or更换荧光滤镜或镜头进行实验.
2.成像模糊: 成像模糊经常发生于长时间observe或过度曝光of情况下, 此外, 可能还会is样本移动导致of. can调整曝光时间, 避免超过most大recommend曝光时间, 同时stable样本, 避免样本移动, using样本固定装置.
3.自动对焦失效: 自动对焦失效可能会造成成像模糊or无法成像ofQuestion. 若自动对焦失效, 可能is镜头转动不良或is样本of高度不一致导致. can调整镜头, 确保其be able to自由转动, or调整样本of高度, 尝试多种不同高度of样本, observeis否能自动对焦.
4.其他Question: 除了上述故障之外, 荧光显微镜还可能遇到其他Question, for example成像偏移, 白平衡不良, 成像亮度不足, 通道冲突etc.. can尝试调整成像位置, 确保成像中心位置正确, 调整白平衡参数, 确保成像色彩正常, 调整光源亮度, or调整荧光通道参数.
