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产品定义
胆汁酸 (bile acids,BA) , for胆汁ofmainlyhave机成分, is几种结构类似of类固醇酸of统称, according to来源can分for初级胆汁酸andtimes级胆汁酸, 具have多种生理and药理功能. 胆汁酸代谢组学Detection Methodutilizingbased onLC-MSofMRM靶向代谢组方法对样本中of30多种胆汁酸进行绝对定量analyze.
技术路线
技术优势
1. 高Specificity, 高Accuracy: adoptingMRM技术精确定性, 绝对定量
2. 先进平台:Sciex Q-trap质谱, 线性范围广
3. 专属kit: 高通量detect30多种常见胆汁酸
4. 严格质控: 内标+外标双重质控, standard人工校对
Detection Indicators
编号 | 代谢物名称 | Metabolites |
1 | 甘氨鹅脱氧胆酸 | Glycochenodeoxycholic acid |
2 | 甘氨胆酸 | Glycocholic acid |
3 | 甘氨脱氧胆酸 | Glycodeoxycholic acid |
4 | 甘氨猪脱氧胆酸 | Glycohyodeoxycholic acid |
5 | 甘氨石胆酸 | Glycolithocholic acid |
6 | 甘氨熊脱氧胆酸 | Glycoursodeoxycholic acid |
7 | 牛磺鹅脱氧胆酸 | Taurochenodeoxycholic acid |
8 | 牛磺胆酸 | Taurocholic acid |
9 | α-牛磺鼠胆酸 | Tauro alpha-muricholic acid |
10 | β-牛磺鼠胆酸 | Tauro beta-muricholic acid |
11 | 牛磺猪胆酸 | Taurohyocholic acid |
12 | 牛磺脱氧胆酸 | Taurodeoxycholic acid |
13 | 牛磺猪脱氧胆酸 | Taurohyodeoxycholic acid |
14 | 牛磺石胆酸 | Taurolithocholic acid |
15 | 牛磺熊脱氧胆酸 | Tauroursodeoxycholic acid |
16 | 鹅脱氧胆酸 | Chenodeoxycholic acid |
17 | 胆酸 | Cholic acid |
18 | α-鼠胆酸 | alpha-Muricholic acid |
19 | β-鼠胆酸 | beta-Muricholic acid |
20 | γ-鼠胆酸/猪胆酸 | gamma-Muricholic acid\Hyocholic acid |
21 | 脱氧胆酸 | Deoxycholic acid |
22 | 猪脱氧胆酸 | Hyodeoxycholic acid |
23 | 异石胆酸 | Isolithocholic acid |
24 | 石胆酸 | Lithocholic acid |
25 | 熊脱氧胆酸 | Ursodeoxycholic acid |
26 | ω-鼠胆酸 | omega-Muricholic acid |
27 | 12-酮石胆酸 | 12-Ketolithocholic acid |
28 | 脱氢胆酸 | 3-Dehydrocholic acid |
29 | 6,7-二酮石胆酸 | 6,7-Diketolithocholic acid |
30 | 7-酮脱氧胆酸 | 7-Ketodeoxycholic acid |
31 | 7-酮石胆酸 | 7-Ketolithocholic acid |
32 | 鼠脱氧胆酸 | Murideoxycholic Acid |
33 | 别胆酸 | Allocholic acid |
34 | 原胆酸 | Apocholic acid |
Data Analysis
应用领域
肝胆疾病, 肠炎, 肿瘤etc.research
| Sample Type | 送样量 | 预processandstore |
| 动物tissue | ≥200 mg | PBS wash去除残留血液and污染物, 冲洗干净. 用tissue剪或手术刀将tissue剪切成 1cm3 左右of小块, 样品称重, etc.量分装. 液氮速冻, -80°C store, 干冰transport. |
| Serum | ≥300 μL | 收集好of全血室温静置 30-60 min, or 4°C 放置 2h, 3000 g centrifuge 10 min, 取上清, 液氮速冻, -80°C store, 干冰transport. |
| 血浆 | ≥300 μL | 收集好of全血加入抗凝剂 (推荐adopting肝素抗凝剂, 不recommendadopting柠檬酸or EDTA) , 室温静止 30 minutes, 1300g-2000g centrifuge 10min, 取上清, 液氮速冻, -80°C store, 干冰transport. |
| 尿液 | ≥200 μL | 5000×g 4°C centrifuge 30-60min, 取上清, -80°C store, 干冰transport. |
| 粪便 | ≥300 mg | 新鲜粪便样本收集好后, 立即用液氮速冻process15 min, store至-80℃冰箱 |
| 肠道内容物 | ≥300 mg | 新鲜肠道内容物样本收集好后, 立即用液氮速冻process15 min, store至-80℃冰箱 |
| 胆汁etc.体液 | ≥200 μL | 1000g-2000g 4°C centrifuge 10min, (或using 0.22μm 滤膜过滤) , 取上清, -81°C store, 干冰transport. |
| 悬浮culturecell | ≥10^7 | centrifuge收集悬浮cell (保证每copies收集ofcell数量一致! ! ) , adopting PBS 清洗两遍, 然后adopting生理盐水 (0.9%氯化钠溶液) 洗一遍, 每times清洗后adopting小于 1000g centrifuge力 4°C 低速centrifuge 3 minutes, 完全弃去上清 (上述整pcs过程需尽量迅速操作) , 收集in 1.5ml centrifuge管中. 液氮速冻后-80°C store, 干冰transport. |
| 贴壁culturecell | ≥10^7 | 收集culture好of贴壁cell (保证每copies收集ofcell数量一致! ! ) 去除干净Culture Medium, adopting预冷of PBS 洗两遍, 然后再times加入预冷ofPBS, 把culture容器中of所havecell都收集下来 (一定要刮取干净! ! ) , 收集in 1.5 mL centrifuge管中, 4°C 低速centrifuge, 完全弃去上清 (上述整pcs过程需尽量迅速操作) . cell沉淀in液氮速冻后-80°Cstore, 干冰transport. |
| Cell Culture上清 | ≥10 mL | 1000 g, 4°Ccentrifuge3 minutes, 取上清, -80°C store, 干冰transport. |
样品前process:
Question: 胆汁酸is亲水性化合物, 不易挥发, need进行适当of衍生化process以提高其挥发性.
解决方案: 常用of衍生化方法including硅烷化, 酯化etc., 这些反应need精确控制条件以确保完全转化, 同时避免副产物of生成.
instrument设置:
Question: GC-MSinstrument参数 (such as温度程序, 载气流速etc.) need针对胆汁酸of特性进行optimize.
解决方案: through试验不同of条件, 找到most佳of色谱分离and质谱detect条件, 确保胆汁酸ofhave效分离andaccuratedetect.
背景干扰:
Question: 样品中可能存inwith胆汁酸结构相似of化合物, 这些化合物可能干扰胆汁酸ofdetect.
解决方案: using选择性更高ofdetect器 (such as离子阱质谱detect器) 或optimize色谱条件以减少背景干扰.
Sensitivity:
Question: 胆汁酸in复杂样品中of浓度可能较低, need高SensitivityofDetection Method.
解决方案: usingSensitivity较高of质谱detect器, 并结合衍生化技术提高胆汁酸of挥发性, 从而提高detectSensitivity.
定量Accuracy:
Question: 定量analyzeofAccuracy受到多种因素of影响, such as样品process过程中of损失, instrument响应of波动etc..
解决方案: using内标法或外标法进行定量analyze, 同时定期进行instrument校准and维护, 以确保定量结果ofAccuracy.
数据解析:
Question: GC-MSanalyze产生of数据量大, needprofessionalof知识and经验进行解析.
解决方案: usingprofessionalofData Analysis软件, 结合standard谱图and文献数据进行比对and解析.
GC-MS (气相色谱-质谱联用) detect胆汁酸时, 可能会遇到一些常见Question, 以下is一些可能of挑战及其解决方案:
